IPTG CAS: 367-93-1 Olupese Iye
Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG) jẹ afọwọṣe sintetiki ti lactose ti a lo nigbagbogbo ninu iwadii isedale molikula ati awọn ohun elo imọ-ẹrọ.IPTG jẹ akọkọ ti a lo lati fa ikosile ti awọn Jiini ni awọn eto kokoro-arun, nibiti o ti ṣe iranṣẹ bi okunfa molikula lati ṣe ipilẹṣẹ transcription ti awọn jiini ibi-afẹde.
Nigbati a ba fi kun si alabọde idagba, IPTG ti gba soke nipasẹ awọn kokoro arun ati pe o le sopọ mọ amuaradagba lac repressor, ni idilọwọ lati dina iṣẹ ṣiṣe ti lac operon.Lac operon jẹ iṣupọ awọn jiini ti o ni ipa ninu iṣelọpọ lactose, ati nigbati a ba yọ amuaradagba ipanilara kuro, awọn Jiini ti han.
IPTG ni igbagbogbo lo ni apapo pẹlu olupolowo mutant lacUV5, eyiti o jẹ ẹya ti nṣiṣe lọwọ ti olupoki lac.Nipa apapọ ifasilẹ IPTG pẹlu olupolowo mutant yii, awọn oniwadi le ṣaṣeyọri awọn ipele giga ti ikosile jiini.Eyi ngbanilaaye fun iṣelọpọ awọn iwọn nla ti amuaradagba fun iwẹwẹ tabi awọn ohun elo ibosile miiran.
Ni afikun si ikosile pupọ, IPTG tun nlo nigbagbogbo ni awọn ayẹwo iboju buluu/funfun.Ninu ilana yii, jiini lacZ ni igbagbogbo dapọ si pupọ ti iwulo, ati awọn kokoro arun ti o ṣaṣeyọri jiini idapọ yii yoo ṣe agbejade enzymu β-galactosidase ti nṣiṣe lọwọ.Nigbati a ba ṣafikun IPTG pẹlu sobusitireti chromogenic gẹgẹbi X-gal, awọn kokoro arun ti o ṣafihan jiini idapọmọra yipada buluu nitori iṣẹ ṣiṣe ti β-galactosidase.Eyi ngbanilaaye fun idanimọ ati yiyan awọn igara isọdọtun ti o ti ṣaṣeyọri jiini ti iwulo.
Ifilọlẹ ikosile jiini: IPTG jẹ lilo nigbagbogbo lati fa ikosile ti awọn jiini ibi-afẹde ni awọn eto kokoro-arun.O ṣe afiwe lactose inducer adayeba ati sopọ mọ amuaradagba lac repressor, ni idilọwọ lati dinamọ lac operon.Eyi ngbanilaaye fun igbasilẹ ati ikosile ti awọn Jiini ti o fẹ.
Ikosile Amuaradagba ati isọdọmọ: Ifibọ IPTG nigbagbogbo ni a lo lati ṣe agbejade titobi nla ti awọn ọlọjẹ atunpo fun awọn idi oriṣiriṣi, gẹgẹbi awọn iwadii biokemika, iṣelọpọ itọju, tabi itupalẹ igbekale.Nipa lilo awọn olutọpa ikosile ti o yẹ ati ifilọlẹ IPTG, awọn oniwadi le ṣaṣeyọri awọn ipele giga ti iṣelọpọ amuaradagba ibi-afẹde ni awọn ọmọ ogun kokoro-arun.
Ṣiṣayẹwo buluu/funfun: IPTG ni a maa n lo nigbagbogbo ni apapo pẹlu jiini lacZ ati sobusitireti chromogenic, gẹgẹbi X-gal, fun awọn ayẹwo iboju buluu/funfun.Jiini lacZ ni igbagbogbo dapọ si jiini ti iwulo, ati awọn kokoro arun ti o ṣaṣeyọri ṣaṣeyọri jiini idapọ yii yoo ṣe iṣelọpọ β-galactosidase ti nṣiṣe lọwọ.Nigbati IPTG ati sobusitireti chromogenic ti wa ni afikun, awọn igara atunkopọ ti n ṣalaye jiini idapọmọra yipada buluu, gbigba fun idanimọ irọrun ati yiyan.
Iwadi ti ilana jiini: IPTG fifa irọbi ni a lo nigbagbogbo ninu iwadii lati ṣe iwadi ilana ti awọn Jiini ati awọn operons, paapaa lac operon.Nipa ifọwọyi awọn ifọkansi ti IPTG ati mimojuto ikosile ti awọn paati lac operon, awọn oniwadi le ṣe iwadii awọn ọna ṣiṣe ti ilana jiini ati ipa ti awọn ifosiwewe pupọ tabi awọn iyipada.
Awọn ọna ikosile Jiini: IPTG jẹ paati pataki ni ọpọlọpọ awọn eto ikosile pupọ, gẹgẹbi awọn eto orisun-olugberuwo T7.Ninu awọn ọna ṣiṣe wọnyi, olupolowo lac nigbagbogbo ni a lo lati wakọ ikosile ti T7 RNA polymerase, eyiti, lapapọ, ṣe igbasilẹ awọn jiini ibi-afẹde labẹ iṣakoso ti awọn ilana olupolowo T7.A lo IPTG lati fa ikosile ti T7 RNA polymerase, ti o yori si imuṣiṣẹ ti ikosile jiini ibi-afẹde.
| Tiwqn | C9H18O5S |
| Ayẹwo | 99% |
| Ifarahan | funfun lulú |
| CAS No. | 367-93-1 |
| Iṣakojọpọ | Kekere ati olopobobo |
| Igbesi aye selifu | ọdun meji 2 |
| Ibi ipamọ | Itaja ni itura ati ki o gbẹ agbegbe |
| Ijẹrisi | ISO. |
